Page 130 - 理化检验-化学分册2024年第十二期
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覃 勇，等：不饱和脂肪酸结构表征的质谱分析方法的研究进展


              YOO等   [80] 采用电子诱导解离（EID）碎裂UFA金                   甲醇溶液引入ESI源，在负离子模式下得到[M−
                                                                                                −
                                      +
                                                                         −
              属加合离子[M+Mn−H] ，发现双键处断裂所得                          H+NaF] ，之后对[M−H+NaF] 进行CID裂解
              碎片离子峰强度明显较低，根据该特征可以判断所                            获取；②将含氢氧化钠或碳酸氢钠以及UFA的甲醇
              有双键的位置。但由于采用EID碎裂，除电荷远程                           溶液引入ESI源，在负离子模式下直接获取。获得
              裂解外，还存在其他裂解方式，碎裂图谱信息较为                            的[M−2H+Na] 离子是由羧基和脂肪链双烯丙基
                                                                                −
              复杂，且离子信号较低。RANDOLPH 等                 [81-82] 采用  位均失去质子而形成的稳定共轭负离子。在CID条
              低能CID方式将三-邻二氮杂菲碱土金属络合物与                           件下，该共轭负离子的双键及其邻位或烯丙基位会
                                 −
              UFA负离子[M−H] 发生离子交换形成的[M−                          经电荷导向裂解过程产生与双键位置相关的特征离
                                                 2+
                                                                                                    −
                                     2+
                     +
                                2+
              H+Cat] （Cat=Mg 、Ca 、Sr       2+ 或Ba ）碎裂，得         子。由于MUFA形成的[M−2H+Na] 强度低，以
              到了可以反映双键位置的特征离子。该方式提升了                            及含两个双键的UFA反应所得[M− 2H+Na] 的
                                                                                                           −
              反应的可控性以及谱图的重现性，有利于双键位置                            碎裂特异性差，本方法不适用于含有一个或两个双
              的判断。                                              键的UFA位置异构体的确定，仅适用于含有不小于
                                                           -
                  2013年，WANG等      [83] 采用AMPP、 N-（苯甲胺）         3个双键的UFA位置异构体的确定。
              2，4，6-三甲基吡啶鎓 （BMA-TMP）、 N-（4-氨基甲                       由于UFA中双键可吸收特定波长紫外光，导
                      -
              基苄基）2，4，6-三甲基吡啶鎓和4-氨基甲基-1-甲                       致电子被高能激发而发生UFA直接碎裂或UFA分
              基吡啶-1-鎓 （AMMP）等衍生化试剂对脂肪酸进行                        子内能量重新分配后碎裂。目前已有多项研究                       [89-90]
              酰胺化来考察电荷环境对远程裂解的影响。探究发                            采用紫外光解离质谱技术分析UFA，该方法基于碳
              现，整个电荷体系为共轭体系，而非体系中电荷所                            碳双键对光子吸收的选择性以及临近碳碳双键的
              处位置，与羰基之间的距离对电荷远程裂解方式影                            位置易发生断裂来获得高强度的特征离子，从而实
              响极大。上述研究结果说明，AMPP、BMA-TMP、                        现UFA位置异构体的区分。采用光敏衍生化试剂，
              AMMP衍生化产物离子的脂肪链具有大致相同的                            如1-[3-（氨基甲基）-4-碘苯基]吡啶-1-鎓、1-[4-（氨
                                                                        -
              裂解方式，该裂解方式可产生与双键位置相关的碎                            基甲基）3-碘苯基]吡啶-1-鎓、4-碘苯胺、 N-（2-氨
                                                                        -
              片离子。YANG等        [84]  采用AMPP对UFA进行衍生             基乙基）4-碘苯甲酰胺等            [91-93] ，结合光解离质谱技
              化，并根据衍生化产物碎裂图谱中近双键位置离子                            术，可实现衍生化产物在离子源内的自由基定向解
              强度的下降确定双键位置，以及根据相差40 Th的                          离，进而根据所得特征离子来判断双键位置，并通过
              系列碎片离子确定多个双键位置的存在。之后，其                            CID裂解获取多级质谱图。
              将该方法用于人血清中UFA的筛查和量化，成功检                                其他可以解析双键位置的衍生化-质谱法还
              测出α-亚麻酸和γ-亚麻酸，并证明中性酯中γ-亚麻                         有很多，如ZHANG等          [94]  以氯胺-T为衍生化试剂
              酸和α-亚麻酸的比率比二者非酯化的比率高出3倍。                          对UFA和磷脂酰胆碱的双键进行衍生化，再通过
              FRANKFATER等      [85] 实现了AMPP衍生化与原位质              CID碎裂获取与双键位置有关的特征碎片信息，并
              谱的联用，并评价了基质辅助激光解吸电离-串联飞                           将该方法用于人甲状腺癌组织中UFA的探究；利
              行时间质谱在脂肪酸结构鉴定方面的应用。此外，将                           用高效液相色谱-大气压化学电离-串联质谱法分
              脂肪酸甲酯（FAME）转化为二甲基  唑啉（DMOX）                       析FAME时，FAME中双键可与乙腈形成加合离
              衍生物，然后进行串联质谱分析，也可以得到用于双                           子[M+C 3 H 5 N] +·  ，经质谱分析后可获取与双键位置
              键位置判断的碎片离子           [86] 。                       有关的特征碎片信息           [95] ；以氧气为衍生化试剂，与
                  由于脂肪链断裂时存在大量非选择性断裂，                           MUFA发生氧化反应获取4种烯醇异构体，再通过
              UFA电荷远程裂解所得碎裂图谱较为复杂且特征                            CID裂解获取4种与双键位置相关的碎片离子                    [96] 。
              离子信噪比低，不易于判断化合物碳碳双键的位置。                                解析UFA双键位置是目前的研究热点之一，常
              此外，与P-B反应、环氧化反应、臭氧解反应相比，电                         用方法包括P-B反应、环氧化反应、臭氧解反应、电
              荷远程裂解对形成的母离子有一定要求，采用该裂                            荷远程裂解等，其他各类衍生化-质谱法也在不断涌
              解方式难以实现样品的原位分析。                                   现。这些质谱表征方法在衍生化反应速率、装置普
              1. 2. 5 其他方法                                      适性、原位分析的适用性、产物离子的质谱响应和谱
                  THOMAS等     [87-88] 通过以下两种方式获取UFA             图复杂性等方面各有不同（见表2），使用时需根据具
                              −
              的[M− 2H+Na] 离子：①将含氟化钠和UFA的                        体情况选择合适方法。
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