Page 107 - 理化检验-化学分册2025年第三期

周江平，等：氯甲酸异丁酯衍生结合气相色谱-质谱法测定葡萄酒和黄酒中7种生物胺的含量

向溶液中加入500 μL乙酸乙酯，涡旋提取5 min，以 2. 5 标准曲线

转速5 000 r · min −1 离心1 min，取乙酸乙酯提取液 取适量的50 mg · L −1 混合标准溶液，按照1. 3节
上机检测。经分析发现，有机溶剂除杂效果不明显， 试验方法衍生并处理，得到各生物胺的质量浓度为
且回收率不满足试验要求。 0. 2，0. 5，1. 0，2. 0，5. 0，10. 0 mg · L −1 ，内标质量
PVPP是一种水溶性高分子化合物，既能溶于 浓度为5. 0 mg · L −1 的混合标准溶液系列，并按照
水，又溶于大部分有机溶剂，拥有良好的络合能力， 仪器工作条件测定，以生物胺与内标的质量比为横
在食品、医疗行业常作为澄清剂、吸附剂等，可吸附 坐标，以对应生物胺衍生物与内标的峰面积比为纵
坐标绘制标准曲线。结果表明，各生物胺标准曲线
酒中一些沉淀物而去除杂质干扰。取3组试管， 每组
−1 的线性范围均为0. 2~10. 0 mg · L −1 ，线性回归方程
准确吸取1 mL空白水样，加入50 mg · L 混合标准
和相关系数见表2。
溶液100 μL、50 mg · L −1 内标溶液100 μL、300 μL
饱和碳酸氢钠溶液和0. 01 g PVPP，涡旋混匀5 min， 表2 线性参数
Tab. 2 Linearity parameters
以转速5 000 r · min −1 离心1 min，将液体全部转移
生物胺 线性回归方程 相关系数
至新的锥形试管后采用2. 4节中上述方法继续衍生
2-PEA y=1. 872x+1. 970×10 −1 0. 998 0
分析。结果显示，加入PVPP后，空白加标样品中
PUT y=9. 640×10 −1 x+4. 200×10 −2 0. 999 0
生物胺的回收率为 86. 6%~104%，相对标准偏差 CAD y=9. 310×10 −1 x+4. 400×10 −2 0. 999 0
（RSD）为 0. 27%~5. 0%，说明加入PVPP不会干 HIS y=1. 580×10 −1 x−5. 000×10 −3 0. 996 5
扰测定结果。因此，试验选择在样品中加入PVPP TRY y=3. 674x−3. 040×10 −1 0. 998 0
−1
去除酒中色素、沉淀等杂质。 TYR y=4. 742x+3. 570×10 0. 998 5
−2 x+1. 000×10 −3 0. 999 5
OA
y=2. 100×10
另外，参考液液微萃取反应条件 ，将提取时的乙
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酸乙酯试剂更改为衍生结束加入100 μL乙醇、150 μL 2. 6 检出限、测定下限、精密度和回收试验
二氯甲烷。试验结果表明，使用二氯甲烷提取时生 分别对葡萄酒和黄酒样品进行 0. 5，2. 0，
物胺衍生物的响应值优于乙酸乙酯提取时的，因此 5. 0 mg · L −1 等3个浓度水平的加标回收试验，计算
试验最终选择以二氯甲烷为萃取剂。 回收率和测定值的RSD，结果见表3。若样品中生

表3 精密度和回收试验结果（n=6）
Tab. 3 Results of tests for precision and recovery (n=6)
加标量ρ/ 葡萄酒 黄酒
生物胺
（mg·L −1 ） 本底值ρ/ （mg·L −1 ） 回收率/% RSD/% 本底值ρ/ （mg·L −1 ） 回收率/% RSD/%
2-PEA 0. 5 0. 06 101 5. 7 0. 27 97. 3 6. 7
2. 0 101 8. 8 108 4. 6
5. 0 107 5. 3 112 1. 4
PUT 0. 5 1. 22 83. 3 1. 5 10. 73 88. 0 0. 70
2. 0 93. 0 1. 1 91. 3 0. 90
5. 0 104 5. 5 96. 1 2. 1
CAD 0. 5 0. 03 92. 0 9. 4 1. 35 103 3. 5
2. 0 93. 0 2. 4 110 3. 0
5. 0 108 6. 9 99. 8 2. 3
HIS 0. 5 0. 12 94. 7 5. 9 7. 52 107 0. 80
2. 0 107 2. 8 108 2. 2
5. 0 104 5. 0 116 2. 3
TRY 0. 5 - 107 8. 5 0. 05 91. 3 9. 3
2. 0 95. 8 4. 2 109 3. 4
5. 0 111 4. 3 105 2. 7
TYR 0. 5 0. 22 97. 3 5. 7 5. 63 101 1. 5
2. 0 98. 8 2. 5 106 2. 3
5. 0 112 3. 9 104 1. 0
OA 0. 5 0. 17 111 2. 9 4. 33 101 1. 5
2. 0 105 2. 7 114 1. 1
5. 0 112 3. 2 107 1. 6
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