Page 25 - 理化检验-化学分册2025年第三期

淳泽利，等：超高效液相色谱-串联质谱法同时测定雪上一支蒿中7种生物碱类化合物的含量

碱、苯甲酰次乌头原碱和苯甲酰新乌头原碱的含量； 头碱和苯甲酰乌头原碱的含量。
精密移取供试品溶液Ⅰ适量，用50%甲醇溶液稀释 2 结果与讨论
100倍，即得供试品溶液Ⅱ，用于测定雪上一支蒿乙
素的含量；精密移取供试品溶液Ⅱ适量，用50%甲 2. 1 色谱行为
醇溶液稀释10倍，即得供试品溶液Ⅲ，用于测定乌 混合标准溶液的MRM色谱图见图1。

图 1 混合标准溶液的 MRM 色谱图
Fig. 1 MRM chromatograms of the mixed standard solution
2. 2 提取条件的选择 以 80% 甲醇溶液为提取溶剂，提取 1 次，试验
中药材的提取方式主要有超声、浸泡、回流等， 考察了超声提取时间分别为 5，10，20，30，45 min
文献[20]报道铁棒锤回流提取后因温度升高而导致 时，雪上一支蒿样品中 7 种生物碱类化合物的提取
乌头碱、新乌头碱、次乌头碱3种双酯型生物碱的含 效果。结果表明，雪上一支蒿样品中 7 种生物碱类
量大大下降，故试验在考察提取方式时，主要考察在 化合物的总峰面积随超声提取时间的延长而增大，
25 ℃条件下超声提取及浸泡过夜两种提取方式。经 当超声提取时间不小于 20 min时，7 种生物碱类化
超声提取和浸泡过夜后，雪上一支蒿样品中7种生物 合物总峰面积略微减小。因此，试验选择的超声提
碱类化合物的提取率差异不大。因超声提取操作简 取时间为20 min。
单、提取时间短，试验选择超声的方式对雪上一支蒿 2. 3 标准曲线、检出限和测定下限
样品中7种生物碱类化合物进行提取。 按照仪器工作条件测定混合标准溶液系列，以
固定提取时间为20 min，超声提取1次，考察了 7种生物碱类化合物的质量浓度为横坐标，对应的峰
提取溶剂甲醇溶液体积分数分别为30%，50%，60%， 面积为纵坐标，绘制标准曲线。结果显示，7种生物
70%，80%，90%，100%时，雪上一支蒿样品中7种生 碱类化合物的质量浓度在1. 0~100. 0 μg · L −1 内与
物碱类化合物的提取率。结果表明，雪上一支蒿样品 对应的峰面积呈线性关系，得到的线性回归方程和
中7种生物碱类化合物提取率随甲醇体积分数的增大 相关系数见表2。
而增大，当甲醇体积分数不小于80%时，提取率趋于 以3倍信噪比 （S/N）计算检出限（3S/N），以10倍
平稳。因此，试验选择80%甲醇溶液作为提取溶剂。 信噪比计算测定下限（10S/N），结果见表2。

表2 线性参数、检出限和测定下限
Tab. 2 Linearity parameters, detection limits and lower limits of determination
化合物 线性回归方程 相关系数 检出限ρ/（μg·L −1 ） 测定下限ρ/（μg·L −1 ）
雪上一支蒿乙素 y=3. 415×10 x+3. 395×10 3 0. 999 6 0. 019 5 0. 064 9
3
3
苯甲酰新乌头原碱 y=4. 002×10 x+3. 488×10 3 0. 999 5 0. 004 6 0. 015 3
3
苯甲酰乌头原碱 y=3. 350×10 x+3. 852×10 3 0. 999 6 0. 011 8 0. 039 4
3
苯甲酰次乌头原碱 y=2. 590×10 x+1. 882×10 3 0. 999 8 0. 011 5 0. 038 3
新乌头碱 y=5. 652×10 x+3. 936×10 3 0. 999 8 0. 002 1 0. 006 9
3
次乌头碱 y=2. 299×10 x+4. 972×10 2 0. 999 9 0. 013 3 0. 044 4
3
3
乌头碱 y=4. 256×10 x+7. 172×10 3 0. 999 9 0. 010 8 0. 035 8
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