Page 49 - 理化检验-化学分册 2021年第六期

P. 49

赵清佳, 等: 在线固相萃取Ｇ超高效液相色谱Ｇ串联质谱法测定尿液中芬太尼及其代谢物的含量

２．５基质效应、标准曲线与检出限表３线性参数
由于在线前处理的系统设计不能直接得到固相 Tab．３ Linearit yp arameters
萃取后目标物的回收率 [ １３ , １５ ] , 按照« 中华人民共和化合物线性范围 / 线性回归方程相关系数
ρ
( n g L －１ )
国药典» ２０１５年版中在线前处理样品的基质效应的
考察方法, 本试验收集６批不同健康志愿者的空白芬太尼２．００~８００ y＝４．３８３×１０ x＋０．９９９７
－３
１．２３３×１０－２
尿液, 分别添加低、高浓度水平的芬太尼和去甲芬太
－３
尼, 制得基质匹配的混合标准溶液, 按试验方法进行去甲芬太尼２．００~８００ y＝３．７３８×１０ x＋０．９９９４
１．４９５×１０－３
预处理和进样分析, 考察目标物的响应的总变异系
数.总变异系数＝标准偏差 / 平均值 ×１００％ , 若总谱条件下, 芬太尼和去甲芬太尼的检出限( ３S / N ) 均
变异系数不大于１５％ , 说明基质无干扰.结果显为０．２００n g L , 测定下限( １０S / N ) 均为２．００n g
－１

示: ６批样品中, 芬太尼的响应的总变异系数不大于 L .该方法的检出限高于文献[ １６ ] 报道的芬太尼
－１
－１

２．５％ , 去甲芬太尼响应的总变异系数不大于７．１％ , 的最高检出限( ０．００３ μ g L ).
均符合要求, 说明基质对样品测定无影响. ２．６精密度和回收试验
配制芬太尼和去甲芬太尼的质量浓度分别为分别将测定下限、低、中、高等４个浓度水平的
２．００ , １００ , ２００ , ４００ , ６００ , ８００n g L 的混合标准溶混合标准溶液进行预处理和进样分析.当天制备样
－１

液系列, 按照试验方法进样分析.以目标物的质量品, 每个浓度水平平行测定５次, 计算得到回收率和
浓度为横坐标, 对应的峰面积为纵坐标绘制标准曲测定值的相对标准偏差 ( RSD ), 考察日内精密度.

线, 其线性范围、线性回归方程和相关系数见表３ . 连续３d同一时间测定混合标准溶液, 计算得到回
检出限定义为信噪比( S / N ) 不小于３的最低目收率和测定值的 RSD , 考察日间精密度(« 中华人民
共和国药典» ２０１５年版仅监测２d ), 所得结果见
标物的质量浓度, 测定下限定义为信噪比不小于１０
的最低目标物的质量浓度. 结果显示, 在优化的色表４ .

表４精密度和回收试验结果

Tab．４ Resultsoftestsfor p recisionandrecover y
日内( n＝５ ) 日间( n＝３ )
ρ
混合标准溶液 /
化合物
ρ
ρ
－１ ) 测定值 / 回收率 / RSD / 测定值 / 回收率 / RSD /
( n g L
( n g L －１ ) ％％ ( n g L －１ ) ％％
芬太尼２．００２．０６１０３４．９２．０７１０３４．７
４．００４．０８１０２２．６４．０９１０２３．１
４００４０９１０２６．６３９９９９．８８．５
６００５７５９５．８７．２５９９９９．８５．７
去甲芬太尼２．００２．０６１０３４．９２．１６１０７５．９
４．００４．０５１０１５．５４．０９１０２４．１
４００４２７１０７５．０４３６１０９４．１
６００５３７８９．５１４５２８８８．０９．９

由表４可知: 测定值的 RSD 均小于１５％ , 说明稀释２０倍, 每组平行测定５次, 来考察方法的稀释
方法的精密度较好. 可靠性.结果表明, 芬太尼和去甲芬太尼的短期稳
２．７稳定性试验和稀释效应定性( 室温放置４h )、预处理后自动进样盘中的稳
按试验方法测定低、高浓度水平的混合标准溶定性( 放置２４h )、冻融稳定性( 每隔２４h , 室温解冻
液, 每个浓度水平平行测定３次来评估样品的稳定２０min , 再放入－４０ ℃ 冷冻保存, 循环３次)、长期
性.由于 SD 大鼠体内代谢后目标物的浓度远远超稳定性( －４０ ℃ 冷冻保存１０d ) 的测定值的 RSD 均
过线性范围, 因此分别设定稀释因子１为稀释小于１４％ , 稀释可靠性的测定值的 RSD 均小于
２０００倍、稀释因子２为稀释２００倍和稀释因子３为３％ .说明在考察的稀释倍数范围内, 其基质不影响

５１５

44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54