Page 132 - 理化检验-化学分册2025年第三期

刘天宇，等：衍生化在脂肪酸质谱分析中的应用研究进展

化-GC-MS分析牛乳中FAs的方法，于50 ℃碱催化 FAs，以减少衍生过程中潜在的污染，但该方法检测
20 min时甲酯化效率最高， 以GC-MS对50份牛乳样 灵敏度有限，无法使不饱和FAs的反式和顺式异构

品进行定量分析，检出限为0. 009~0. 169 mg · L −1 ； 体相互分离。
YUENYONG 等 [24] 制备了 50 种冷压植物油，将 电喷雾电离（ESI）常用于LC-MS的分析过程，
0. 015 g油样与0. 20 mL甲苯、1. 50 mL甲醇、0. 30 mL 由于电喷雾液滴中携带大量负电荷，抑制FAs中羧
的8. 0%（体积分数）盐酸溶液混合，采用酸催化法 基负离子的形成，导致FAs离子化效率低，质谱检
进行衍生，测得 50 种植物油中单不饱和FAs的质 测信号差。衍生化FAs引入正电荷，可避免酸性流
量分数为10. 17%~80. 25%，多不饱和FAs的质量 动相的离子抑制，提高电离效率和检测灵敏度，是
分数为0~78. 25%，采用主成分分析与方差分析对 当前基于LC-MS检验FAs的主要衍生化思路。常
50种植物油进行差异分析，依据FAs组成及含量差 用衍生化试剂包含N、S等MS响应高的元素，如N-
异对所制备油脂进行分类。 （4-氨甲基苯基）吡啶盐（AMPP） [28-29] 、 N， N-二乙
[31]
硅烷化常用试剂有N-甲基-N-（三甲基硅烷）三 基乙二胺（DEEA） [22，30] 、2-吡啶甲胺（2-PA） 等，
氟乙酰胺（MSTFA）、 N， O-双（三甲基硅烷基）三 在食品与生物样本中应用广泛，反应原理如图2所
氟乙酰胺（BSTFA）以及N-甲基叔丁基二甲基硅 示。在样品制备过程中加入衍生化试剂，能有效提
基三 氟乙酰胺（MTBSTFA）等。PLEIK 等 [25] 利 高LC-MS分析FAs的灵敏度。JAOCHICO等 [32] 提
用MSTFA衍生指纹中的FAs，采用GC-MS研究 出了液相色谱-串联质谱法 （LC-MS/MS）定量检
指纹残存物中不饱和FAs的成分，检出6-十六碳烯 测人类血浆和尿液中短链脂肪酸（SCFA）的方法，
酸和 8-十八碳烯酸等，可为利用指纹中FAs成分 在23 ℃下使用10 μL 1 mol · L −1 3-乙基碳二亚胺盐
进行个体溯源的研究提供参考。MOON等 [26] 使用 酸盐（EDC）和 1 mol · L − 1 O-苄基羟胺（O-BHA）
MTBSTFA衍生，采用气相色谱-串联质谱法（GC- 的混合液对FAs进行衍生化处理，使用C 18 超高效反
MS/MS）对人体唾液中 18 种FAs进行分析，18 种 相液相色谱柱，以0. 1%（体积分数）甲酸溶液-乙醇
FAs的总体回收率为 73. 8%~114%，准确率高达 体系为流动相，采用梯度洗脱程序，在5. 5 min内实
99. 3%，为临床诊断以及法庭科学领域嫌疑人识别 现了良好的基线分离，提升了SCFA衍生产物定量
提供了新思路。 检测的特异性和灵敏度。YANG等 [33] 采用2-溴-1-
2. 2 液相色谱-质谱法 甲基碘化吡啶和3-甲醇-1-甲基碘化吡啶衍生，生成
LC-MS适用于强极性以及弱挥发性物质的检 3-酰基氧基甲基-1-甲基碘化吡啶 （AMMP），采用
测，理论上可无需衍生化便可以对FAs进行直接分 LC-ESI-MS以正离子模式定量分析FAs，检出限为
析。HELLMUTH等 [27] 尝试使用LC-MS直接检测 1. 0~4. 0 nmol · L − 1 ，检测灵敏度比负离子模式下

HOBt—1-羟基苯并三唑；TEA—三乙胺；CMPI—2-氯-1-甲基碘化吡啶；TPP—磷酸三苯酯；DPDS—2,2'-二硫二吡啶
图 2 FAs 与 AMPP、DEEA 和 2-PA 的衍生化反应
Fig. 2 Derivatization reactions of FAs with AMPP, DEEA and 2-PA
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