Page 72 - 理化检验-化学分册 2021年第六期

张 颖, 等: 固相萃取 Ｇ 原子荧光光谱法测定大米中无机硒的含量

铁氰化钾为分析纯; 试验用水由 MilliＧQ Advanta g e
A１０ 型超纯水仪制得( 电阻率大于 １８．２MΩ cm ).
１．２ 仪器工作条件
光电倍增管负高压 ３００V ; 硒空心阴极灯, 灯电
流 ８０mA ; 炉高 ８mm ; 载气为氩气, 流量 ４００mL
min ; 屏蔽气为氩气, 流量１０００mL min ; 延迟
－１
－１
时间 １s ; 读数方式峰面积, 读数时间 １５s ; 进样体积
２mL .
图 １ 提取液的不同酸度对固相萃取柱吸附
１．３ 试验方法
无机硒和硒代氨基酸的影响
称取 经 烘 干 粉 粹 过 筛 的 大 米 粉 ０．５g 置 于
,
Fi g ．１ Effectofdifferentacidit yofextractsolutionon
５０mL 塑料离心管中, 加入 ２０mL 水, 超声 １０min adsor p tionofinor g anicseleniumandseleniumamino
后, 于 ９０ ℃ 水浴振荡提取６０min , 其间每隔１０min acidsb ysolidp haseextractioncolumn
取出, 上下颠倒, 使样品充分混匀, 水浴结束后, 再超
[ １０ , １９ ] －１ 由图 １ 可知: 当提取液的 p H 为 ４~１０ 时, 无机
声提取 ２０min .冷却, 以转速 ８０００r min
离心 １５min , 取上层清液, 用 ５g L 氢氧化钠溶 硒的回收率基本保持不变; 当 p H 大于 ７ 时, 硒代氨

－１
液调至 p H４~７ , 过滤, 移取滤液 １０ mL 作为提取 基酸的回收率逐渐增大.表明 p H 为 ４~７ 时, 无机
液. SAX 强阴离子交换柱经 ３mol L 盐酸溶液 硒的分离效果较好.为排除硒代氨基酸的影响, 试
－１
１０mL 活化、 水 ２０ mL 平衡.将 提 取 液 移 入 交 换 验选择提取液的 p H 为 ４~７ .
－１ －１ ２．３ 洗脱液体积的选择
柱, 流出速率小于 ３mL min , 再用 ３mol L
盐酸溶液 １０mL 洗脱吸附在柱上的无机硒( 洗脱速 试验分别收集 １０ , ２０ , ３０ , ４０ , ５０mL 的洗脱液,
率 １ mL min ), 收集洗脱液.将洗脱液转移至 按试验方法测定硒含量并计算回收率.结果表明:
－１
锥形瓶, 按 GB５００９．９３－２０１７ « 食品安全国家标准 不同体积洗脱液的回收率分别为 ９３．７％ , ９４．１％ ,
食品中硒的测定» 第一法中前处理方法进行湿法 ９４．１％ , ９４．０％ , ９３．９％ , 说明洗脱液体 积 为 １０ mL
[ ２４ ]
消解, 再采用第一法氢化物原子荧光光谱法测定样 时即可获得良好的回收率, 无需进一步增大洗脱液
品中总硒含量, 按 １．２ 节仪器工作条件测定样品中 体积.
２．４ 标准曲线与检出限
无机硒的含量.
按仪器 工 作 条 件 对 ０ , ２．００ , ４．００ , ６．００ , ８．００ ,
２ 结果与讨论 １０．０ μ g L 的硒标准溶液系列进行测定, 以硒的
－１

质量浓度为横坐标, 其对应的荧光强度为纵坐标绘
２．１ 提取剂的选择

制标准曲线.结果显示: 标准曲线在 １０．０ μ g L －１
硒形态的提取方式通常有水提取法、 酸提取法、
以内呈线性关系, 线性回归方程为 y＝１３８．９x＋
碱提取法和酶提取法 [ １０Ｇ１１ ] , 酶提取法将硒蛋白酶解
９０．０７ , 相关系数为 ０．９９９９ .
为硒代氨基酸 [ ２５ ] , 主要目标化合物为硒蛋白.无机
按试验方法连续测定空白样品 １１ 次, 测定结果
硒的提取剂通常为水、 酸或碱试剂, 本试验 在前期
的标准偏差( s ) 为 ０．０２１ μ g L , 以样品称样量为
－１

研究工 作 的 基 础 上 [ １０ , ２５ ] , 采 用 水 提 取 大 米 中 的 无
,
０．５g 定 容 体 积 为 １０ mL 计, 换 算 为 ０．８４ μ g
机硒.
－１ .以 ３ 倍标准偏差计算方法的检出限( ３ s ), 所
k g
２．２ 提取液酸度的选择

得结果为 ２．５２ μ g k g －１ , 以 １０ 倍标准偏差计算方
固相萃取柱选用 SAX 强 阴 离 子 交 换 柱, 需 经

法的测定下限( １０ s ), 所得结果为 ８．４０ μ g k g －１ .
３mol L 盐酸溶液 １０mL 活化、 水 ２０mL 平衡. ２．５ 精密度和回收试验
－１
试验考察了提取液的不同酸度( H３~１０ ) 对无机硒 取普通大米( 无机硒含量较低) 样品, 按 １．３ 节
p
( 硒酸根和亚硒酸根) 加标水溶液和有机硒( 小分子硒
试验方法测定其总硒和无机硒的含量.然后根据国
代氨基酸, 包括硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸) 在 SAX 强
家标准 GB / T２７４０４－２００８ « 实验室质量控制规范
阴离子交换柱上的保留情况, 按试验方法测定相应的
食品理化检测» 附录 F [ ２６ ] 的规定, 在上述样品中加
洗脱液中硒含量并计算回收率, 结果见图１ .
入 ３ 个浓度水平的硒标准溶液, 将大米粉充分振荡
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