Page 117 - 理化检验-化学分册2024年第十二期
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知识与经验 DOI：10. 11973/lhjy-hx220738
离子色谱-脉冲安培检测器法同时测定酵母发酵液中 4 种
糖类物质的含量
李亚茹，覃先武，罗必英，陈少峰，刘静怡，谢 嘉
（安琪酵母股份有限公司，宜昌 443000）
中图分类号：O657. 7 文献标志码：B 文章编号：1001-4020(2024)12-1311-05
糖蜜是酵母生产的主要原料，主要包括甜菜糖 种酵母发酵液中半乳糖、葡萄糖、蔗糖和果糖的含
[1]
蜜和甘蔗糖蜜 。甜菜糖蜜中含有大量蔗糖，而甘 量，以期为监测酵母对糖的利用以及发酵液的处理
蔗糖蜜含有蔗糖和一定量的其他糖。酵母发酵会利 和再利用提供指导。
用糖蜜中可利用的糖，剩余的不被酵母利用的物质
1 试验部分
和新陈代谢所产生的代谢物最终会被离心分离，并
1. 1 仪器与试剂
随酵母发酵上清液排放。酵母发酵上清液主要成分
ICS 5000 型离子色谱仪，配置四元梯度泵、自动
+
包括蛋白质、胶体物质、纤维素和糖蜜中没有被利用
进样器、色谱箱组合、脉冲安培检测器；ME2002E型
的糖类等营养物质，其中的糖类物质主要包含未被
电子天平（感量0. 1 mg）；Milli Q-IQ 7000型超纯水
酵母利用的蔗糖以及蔗糖分解后生成的葡萄糖和果
机；IC Guard C 18 固相萃取小柱；10 mL一次性无菌
糖。测定酵母发酵液中糖类物质的含量不仅可以监
注射器；0. 22 μm水相针式滤膜；GM-0. 33A+1 L型
测酵母对糖蜜中糖的利用率，而且对糖类物质再利
真空抽滤装置。
用等具有一定意义。
半乳糖标准储备溶液：取5 mg半乳糖标准品，
糖类物质的检测方法主要有旋光法 [2-3] 、比色
用水溶解和定容至100 mL，配制成50. 0 mg · L −1 的
法 [4-5] 、滴定法 [6-7] 、色谱法 [8-10] 、色谱-质谱法 [11-13] 、毛
半乳糖标准储备溶液。
细管电泳法 [14-16] 等。其中，色谱法使用较广泛，包括
混合标准储备溶液：分别取10 mg葡萄糖标准
液相色谱法 [17-19] 、离子色谱法 [20-23] 和气相色谱法 [24]
品、5 mg蔗糖标准品、3 mg果糖标准品，加入10 mL
等。气相色谱法通常需要将待测物质衍生为稳定且
50. 0 mg · L −1 的半乳糖标准储备溶液，用水溶解和
易挥发的化合物，操作相对繁琐，易产生误差 [25] 。液
定容至100 mL，配制成半乳糖、葡萄糖、蔗糖、果糖
相色谱法常采用紫外检测器和示差检测器，采用紫 −1
的质量浓度分别为5. 00，100，50. 0，30. 0 mg · L
外检测器时，由于糖类物质稳定性好且在紫外光下
的混合标准储备溶液。
无吸收光团，需要对待测物质进行衍生，但对于基质
混合标准溶液系列：取 0. 25，0. 5，1，2，3，4，
较为复杂的样品易出现衍生不彻底或生成多种衍生
5 mL混合标准储备溶液，置于50 mL容量瓶中，用
物等问题；采用示差检测器时，不需要衍生化操作，
水定容，配制成半乳糖的质量浓度为0. 025，0. 05，
但是方法灵敏度低、稳定性欠佳。 − 1
0. 10，0. 20，0. 30，0. 40，0. 50 mg · L ，葡萄糖的
糖类物质的检测报道较多，但是还未见酵母发
质量浓度为0. 50，1. 00，2. 00，4. 00，6. 00，8. 00，
酵液样品中糖类物质的检测研究。离子色谱-脉冲 − 1
10. 00 mg · L ，蔗糖的质量浓度为 0. 25，0. 50，
安培器法分析糖及相关化合物时具有分离能力强、 −1
1. 00，2. 00，3. 00，4. 00，5. 00 mg · L ，果糖的质
检测快速、无需衍生化、灵敏度高等优点。本工作利 量浓度为0. 15，0. 30，0. 60，1. 20，1. 80，2. 40，
用糖类物质具有电化学性，且在强碱性流动相中能 −1
3. 00 mg · L 的混合标准溶液系列。
以离子形式存在并被检测的原理，采用C 18 固相萃取 −1
250 mmol · L 氢氧化钠溶液：取50%（质量分
小柱分离，离子色谱-脉冲安培检测器法测定不同菌 数）氢氧化钠溶液（从试剂瓶中间取，不晃动试剂瓶）
20 g于1 000 mL的容量瓶中，用水稀释至刻度，用真
收稿日期：2023-06-28 空抽滤装置抽滤后，将溶液转移至2 L的塑料淋洗液
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