Page 114 - 理化检验-化学分册2024年第十二期

郑国建，等：柱前衍生-二维液相色谱法测定氨基酸配方婴幼儿配方奶粉中牛磺酸的含量

色谱分离，试验考察了分别以水、0. 1%三氟乙酸溶 标准曲线的线性范围为1~20 mg · L −1 ，线性回归方
液、0. 1%（体积分数，下同）甲酸溶液作为水相时对 程为y=10. 56x，相关系数为0. 999 9。
牛磺酸衍生产物测定的影响。结果显示：以水作水 在阴性氨基酸配方婴幼儿配方奶粉样品中加入
相时，无法实现牛磺酸衍生产物的洗脱；以0. 1%甲 不同量的1 mg · L −1 牛磺酸标准溶液，以10倍信噪
酸溶液作水相时，牛磺酸衍生产物存在前沿峰；以 比（S/N）计算测定下限（10S/N）。结果显示，当称
0. 1%三氟乙酸溶液作水相时，牛磺酸衍生产物峰形 样量为1 g，定容体积为50 mL时，牛磺酸的测定下
−1
较为对称，且峰面积较大。因此，试验选择0. 1%三 限为5 mg ·（100 g） ，和GB 5009. 169—2016第二
氟乙酸溶液作流动相水相（A1、A2）。 法提供的测定下限相同，说明本方法满足日常婴幼
2. 2. 2 色谱柱 儿配方奶粉中牛磺酸的定量检测需求。
选择二维液相色谱系统中的色谱柱时既要考虑 2. 4 精密度和回收试验
两个维度色谱体系的兼容性，又要考虑其差异性。 按照试验方法分析婴幼儿配方奶粉和氨基酸配
以C 18 柱作为第一维色谱柱，PFP柱作为第二维色谱 方婴幼儿配方奶粉，并以本底值（以相邻整十数计）
柱进行色谱分离时，牛磺酸衍生产物可以很好地与 的0. 5，1. 0，1. 5倍添加牛磺酸进行加标回收试验，
杂质分离，如图2所示。 每个添加水平重复测定6次， 计算回收率和测定值的
相对标准偏差（RSD），结果见表2。
由表2可知， 牛磺酸的回收率为96. 0%~100%，
测定值的RSD为1. 3%~3. 2%，表明方法准确度和
精密度良好。
2. 5 样品分析
采用本方法和GB 5009. 169—2016第二法对实
验室内部奶粉质控样和市售的3批次不同品牌的氨
图 2 牛磺酸的二维色谱图 基酸配方婴幼儿配方奶粉进行测定，结果见表3。由
Fig. 2 Two-dimensional chromatograms of taurine 于国家标准方法中的液相色谱条件无法有效分离氨
2. 2. 3 阀切换时间 基酸配方婴幼儿配方奶粉中的牛磺酸和杂质，“*”代
为了保证第一维色谱柱中的牛磺酸衍生产物能 表采用国家标准方法前处理后参考文献[8]定量检测
全部被收集到第二维色谱柱中，需进行阀切换时间 所得的测定值。
的确定。图2所示的牛磺酸衍生产物在第一维色谱 由表3可知：对于实验室内部奶粉质控样，本方
柱上的保留时间为6. 5 min，因此将阀切换时间设定 法和GB 5009. 169—2016第二法测定值的相对偏差
为6. 1~7. 0 min，在该时间段将两个色谱柱连通，使 绝对值约为5. 0%，且和标签值基本吻合，说明本方
牛磺酸衍生产物全部进入到第二维色谱柱中。 法在检测普通婴幼儿配方奶粉时和国家标准方法具
2. 3 标准曲线和测定下限 有很好一致性；使用GB 5009. 169—2016第二法联
按照色谱条件测定牛磺酸标准溶液系列，以牛 合文献[8]分析3种氨基酸配方婴幼儿配方奶粉时，
磺酸的质量浓度为横坐标，对应的牛磺酸衍生产物 牛磺酸测定值只有本方法的10%左右，且远小于标
峰面积为纵坐标绘制标准曲线。结果显示，牛磺酸 签值，推测可能与国家标准方法衍生不完全有关；本

表2 精密度和回收试验结果 (n=6)
Tab. 2 Results of tests for precision and recovery (n=6)

样品 本底值w/[mg · (100 g) −1 ] 加标量w/[mg · (100 g) −1 ] 测定值w/[mg · (100 g) −1 ] 回收率/% RSD/%
婴幼儿配方奶粉 38. 9 20 58. 9 100 3. 2
40 77. 7 97. 0 3. 0
60 96. 6 96. 2 2. 2
氨基酸配方 19. 2 10 28. 8 96. 0 2. 3
婴幼儿配方奶粉
20 38. 8 98. 0 2. 2
30 48. 1 96. 3 1. 3
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