Page 70 - 理化检验-化学分册2024年第十二期

陈美芳，等：银纳米溶胶表面增强拉曼光谱法快速测定鱼腥草注射液中依诺沙星的含量

依诺沙星标准品纯度大于98%；硝酸银纯度为 为黄色，继续煮沸，直至溶液变为乳白色，停止加热，
99%；柠檬酸钠纯度为99%；试验用水为超纯水。 自然冷却至室温，以转速3 000 r · min −1 离心1 min，
1. 2 仪器工作条件 收集40 mL上层液体于离心管，加入5 mL水，以转
激光波长785 nm；激光功率499 mW；光谱扫描 速 5 000 r · min − 1 离心 5 min，弃去上清液，再加入
范围200~3 200 cm −1 ；积分时间5 975 ms；积分次数 5 mL水并超声5 min，于4 °C冷藏保存。
2次， 取平均值。 1. 3. 2 溶液的测定
1. 3 试验方法
取 0. 2 mL样品置于SERS管中，加入 0. 1 mL
1. 3. 1 银纳米溶胶的制备 银纳米溶胶，混匀，按照仪器工作条件进行测定。
参考文献[17]制备银纳米溶胶。取 1 mL质量
分数1%的硝酸银溶液置于烧杯中， 加入200 mL水， 2 结果与讨论
以转速8 000 r · min −1 不断搅拌，并加热至沸腾，逐 2. 1 银纳米溶胶的表征
滴加入9 mL质量分数1%的柠檬酸钠溶液至溶液变 试验对自制的银纳米溶胶进行表征，结果见图1。

图 1 银纳米溶胶的表征结果
Fig. 1 Characterization results of silver nanosol
由图1可知：银纳米溶胶近似球形，没有发生聚 说明该模型具有高度显著性；决定系数为0. 980 8，
集现象，粒径为 21~52 nm，具有良好的单分散性； 校正决定系数为0. 956 1，说明生成的模型与实测数
最大紫外吸收峰位于419 nm处，在银纳米颗粒吸收 据有98. 08%的符合度，能够解释95. 61%的变化效
峰所处的波长范围351~570 nm内 [18-20] 。以上结果 应，预测能力可信度较高；失拟项的P值为0. 717 9
说明，自制的银纳米溶胶满足试验要求。 （大于0. 05），失拟项差异不显著，说明模型拟合效
2. 2 检测条件的选择 果较好。考虑到激光功率和积分时间与激光强度成
试验采用响应曲面法中Box-Behnken中心组合 正比，激光功率和积分时间过高时，激光强度较大，
设计考察了3个因素[（积分时间 （A）、激光功率（B）、 样品可能发生热分解 [24] ，试验选择了软件提供的最
样品和银纳米溶胶的体积比（C）对依诺沙星拉曼响 优检测条件（积分时间5 975 ms，激光功率499 mW，
]
应强度（Y）的影响 [21-23] ，使用Design Expert 12. 0软 样品和银纳米溶胶的体积比为2∶1）。
件对Box-Behnken设计矩阵进行多元回归分析，因 2. 3 依诺沙星特征峰的归属
素水平设计表见表1，根据所得结果建立模型，多元 试验采用Gaussian 16软件中的密度泛函理论，
回归分析结果见表2。 结合混合密度泛函b3lyp-d3bj/def2-tzvp理论对依诺
由表2可知： 该模型F值为39. 76（P<0. 000 1）， 沙星分子的空间结构进行了优化，并模拟了其理论
表1 因素水平设计表 拉曼光谱，同时按照试验方法测定了20 mg · L -1 依
Tab. 1 Design table of fator levels 诺沙星标准溶液，结果见图2。
水平 A/ms B/mW C 对模拟和实测试验中的依诺沙星特征峰进行归
-1 4 000 300 2∶1 属，结果见表3。
0 5 000 400 3∶1 2. 4 增强因子的计算
1 6 000 500 4∶1 为了确定银纳米溶胶的增强效果，试验比较了

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