Page 62 - 理化检验-化学分册2025年第三期
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陈嘉科，等：高效液相色谱法同时测定精氨酸布洛芬片剂中布洛芬和精氨酸的含量


              合液（用磷酸调节水的pH至2. 5）为流动相。                           263 nm波长下， 精氨酸在199，203，205，208，210，
              2. 4 检测波长的优化和线性关系的考察                              214 nm波长下的色谱图和线性关系。结果表明： 布
                  目前采用 HPLC 检测不同剂型中布洛芬的波                        洛芬在263 nm波长处吸收弱， 响应值低；在214 nm
              长主要为214，220，225，263 nm等，精氨酸的波长                    波长处吸收强，响应值大且灵敏度高；在220，225，
              主要为 199，205 nm等      [15-22] 。精密量取适量以布洛           230 nm处存在中等吸收，有中等强度的响应值，灵
              芬质量浓度计为 1.0 g·L         − 1 的精氨酸布洛芬混合             敏度好。其中，布洛芬在 214，230，263 nm处的峰
              对照品储备溶液，用体积比为 8∶2 的乙腈 - 水混合                       面积与质量浓度的线性关系均较好，如表 1 所示，
              液稀释，得到以布洛芬质量浓度计为0. 085，0. 170，                    相关系数分别为 0. 999 6，0. 999 2 和 0. 999 7。精
              0. 255，0. 340，0. 425，0. 510，0. 680，0. 850 g · L  −1  氨酸除在波长 214 nm下吸收较弱，响应值不高，其
              的混合对照品溶液系列。按照色谱条件，采取样品                            余所考察的波长下响应值和灵敏度都较高，其中
              一次进样，PDA 全波长扫描，如图 2 所示，布洛芬                        205，208，210 nm处的峰面积与质量浓度的线性关
              和精氨酸在近紫外区均有较强的吸收，响应值均较                            系均较好，如表 1 所示，相关系数分别为 0. 999 3，
              高。试验重点考察了布洛芬在214，220，225，230，                     0. 999 4和0. 999 4。
                                       表1 布洛芬和精氨酸的线性范围、线性回归方程和相关系数
                       Tab. 1 Linear ranges, linear regression equations and correlation coefficients of ibuprofen and arginine

                化合物          检测波长/nm           线性范围ρ/（g·L   −1 ）          线性回归方程                  相关系数
                布洛芬             214               0. 085~0. 850      y=4. 928×10 x+8. 405×10 5    0. 999 6
                                                                              7
                                                                              7         6
                                220                                  y=3. 722×10 x+3. 180×10      0. 991 5
                                                                              7         6
                                225                                  y=2. 951×10 x+2. 980×10      0. 989 0
                                                                              7         5
                                230                                  y=2. 140×10 x+3. 614×10      0. 999 2
                                                                              6         4
                                263                                  y=1. 734×10 x+7. 092×10      0. 999 7
                精氨酸             199               0. 158~1. 580      y=2. 338×10 x+3. 392×10 6    0. 996 6
                                                                              7
                                                                              7
                                203                                  y=1. 313×10 x+2. 784×10 5    0. 997 8
                                                                              6
                                205                                  y=9. 453×10 x－3. 824×10 4    0. 999 3
                                                                              6
                                208                                  y=4. 631×10 x－1. 066×10 5    0. 999 4
                                                                              6         4
                                210                                  y=3. 159×10 x－6. 654×10      0. 999 4
                                                                              6         4
                                214                                  y=1. 254×10 x－2. 511×10      0. 998 9
                  由于布洛芬和精氨酸在多个波长下均有较好的                          和208 nm波长下精氨酸标准曲线的线性参数如表1
              灵敏度和响应值，并且线性关系均达到测定要求，                            所示。
              进一步通过回收试验验证方法在不同波长下的准                                  试验测得精氨酸布洛芬片剂中精氨酸质量分数
              确度和精密度，并最终确定检测波长。回收试验结                            约是布洛芬质量分数的 1. 2~1. 5 倍。和布洛芬相
              果表明，布洛芬在波长230 nm下的回收率较好，精                         比，单位质量浓度的精氨酸由于紫外吸收的摩尔吸
              氨酸在波长 208 nm下的回收率较好，故将 230 nm                     光系数不大，吸收不是太强，导致其在液相色谱中的
              和 208 nm分别作为布洛芬和精氨酸的检测波长，                         响应值不是太高（图2）。此外，按3倍信噪比（S/N）
              230 nm和208 nm检测波长下所得的峰面积与质量                       计算布洛芬和精氨酸的检出限（3S/N），结果分别
              浓度的线性关系作为精氨酸布洛芬片剂中布洛芬和                            为 0. 45，18 mg · L  − 1 ；按 10 倍信噪比计算布洛芬
              精氨酸含量测定的依据。                                       和精氨酸的测定下限（10S/N），结果分别为 1. 50，
              2. 5 标准曲线、检出限和测定下限                                60 mg · L  − 1 ，精氨酸的测定下限大约是布洛芬的
                  如2. 4节所述，按色谱条件测定上述混合对照                        40倍。因此，同时测定片剂中精氨酸和布洛芬含量
              品溶液系列，在230 nm波长处检测布洛芬，208 nm                      时，应充分考虑精氨酸响应灵敏度的特点和测定下
              波长处检测精氨酸，记录峰面积。分别以布洛芬和                            限的要求，可以加大检测片剂的质量浓度或进样量，
              精氨酸的质量浓度为横坐标，对应的峰面积为纵坐                            使精氨酸的响应值处于合适范围，否则可能会导致
              标，绘制标准曲线。230 nm波长下布洛芬标准曲线                         精氨酸的含量测定结果不理想。
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